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富尔根氏核染色液配置 | |
发布时间:2012/6/28 点击次数: 3454 | |
1.席夫氏(Schiff)试剂 将1g碱性复红加入200ml煮沸的蒸馏水中,振荡5分钟(可以使用漩涡混合器、脱色摇床、振荡器等实验仪器帮助振荡混匀),冷至50℃左右过滤,再加入1mol/LHC120ml,摇匀。待冷至25℃时,加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g,摇匀后装在棕色瓶中,用黑纸包好,放置暗处过夜,此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用),再加中性活性炭过滤,滤液振荡1分钟后,再过滤,将此滤液置冷暗处备用(注意:过滤需在避光条件下进行)。 在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥,以消除还原性物质。 2.Schandium固定液 A液:饱和升汞水溶液 50ml升汞水溶液加95%酒精25ml混合即得。 B液:冰醋酸 取A液9毫升+B液1毫升,混匀后加热至60℃。 3.亚硫酸水溶液 10%偏重亚硫酸钠水溶液5ml,1mol/LHCl5ml,加蒸馏水100ml混合即得。(可选择可调速漩涡混匀器混匀)
操作步骤: 1.取培养8—10小时的酿酒酵母涂片,室温下风干。 2.将涂片置于有2%锇酸的蒸汽瓶口上,用锇酸蒸气固定5分钟,然后放入加热至60℃的Schandiun固定液中10分钟(可在恒温金属浴中完成) 3.用水冲洗固定后的标本,然后放在60℃1mol/LHCl中水解8分钟,水洗。 4.用席夫氏试剂作用30—40分钟。 5.由席夫氏试剂中取出放在亚硫酸水溶液中洗5分钟。 6.由亚硫酸水溶液中取出水洗,干燥后,用油镜观察。 更多技术文章推荐: |
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